目前，對成蟲和幼蟲之間的交流的研究不多。很多高度社會化的昆蟲(如螞蟻、蜜蜂和黃蜂)在幼蟲階段要完全依靠那些為它們履行親代行為的父母。例如，不同的食物供應是按照蟲齡來分配。

有跡象表明，幼蟲(意大利蜜蜂)的外激素表明這只幼蟲的存在和狀態。目前，從幼蟲表皮鑒定出10種脂肪酸酪混合物，其中4種分別是甲基亞麻酸酪、甲基亞油酸酪、甲基油酸酪和乙基棕擱酸酯，這幾種酯引誘工蜂在巢房上封一層薄薄的蠟蓋。在巢房被封蓋前幼蟲分泌的脂肪酸酯的量是一天前的20倍。這些幼蟲信息素同樣影響王臺的識別和工蜂的飼喂。因為這些脂肪酸酯對工蜂的行為有重要影響，所以可以將與幼蟲的蟲齡鑒別聯系起來，對小幼蟲和大幼蟲的脂肪酸酯類定量，然后用這些脂肪酸酯混合于石蠟做成人工模型假幼蟲進行試驗。

工蜂幼蟲表皮上的碳氫化合物分別從400只2～3日齡的小幼蟲和200只8～9日齡的大幼蟲萃取，用正戊烷二氯甲烷處理。每一種脂肪酸酪都經過氣質色譜儀和質譜分析來確定其種類和總量。在小幼蟲和大幼蟲身上發現的脂肪酸總量分別是10.6 ng和387 ng，而且脂肪酸酪的組成有所不同。小幼蟲的脂肪酸酯中含有64％的乙脂，而大幼蟲的脂肪酸酯中含有69％的甲酯。

第一個實驗是關于在巢房底部的大幼蟲通過對工蜂正常刺激來影響工蜂的封蓋行為。工蜂將會對摻有大幼蟲信息素的人造石蠟假幼蟲進行封蓋。實驗時，將混有脂肪酸酪的石蠟假幼蟲放在巢房底部或巢房壁上。混合在石蠟模型中的各種信息素的含量分別是在大幼蟲身上發現量的10000倍、1000倍、100倍和10倍。這種模型被做成信息素釋放量和自然條件下幼蟲釋放信息素量相當的狀態。結果表明，石蠟模型中的脂肪酸酯在24小時內被釋放出來的量不超過總量的1％。因此，這些石蠟模型在24小時內各自釋放出脂肪酸酯的量相當于平時幼蟲釋放脂肪酸酯量的100倍、10倍、1倍和0.1倍還略少些。

封蓋行為受脂肪酸酯濃度的影響。首先，最低濃度(0.1倍幼蟲信息素釋放水平)的巢房不被封蓋。第二，當這些假幼蟲模型放在巢房邊緣時，含有相當于幼蟲信息素釋放量1倍信息素濃度的假幼蟲巢房有23％封蓋。相比之下，含有相當于幼蟲信息素10倍和100倍釋放量的假幼蟲巢房的封蓋率分別為57％和69％。可以看出，工蜂是通過信息素來確認巢房內是否有幼蟲。另外，假幼蟲放置在巢房的位置也非常重要，它影響甲酯的揮發。當幼蟲在巢房的邊上時更容易被工蜂發現，放在巢房底部的假幼蟲只有能揮發出更多脂肪酸酯的，含信息素濃度較高的才會封蓋。這表明幼蟲在巢房的位置決定工蜂對幼蟲察覺的化學刺激，從而決定工蜂對幼蟲巢房的封蓋。

工蜂對小幼蟲和大幼蟲相應的混合脂肪酸酯的區別和辨認目前正在研究中。含1倍小幼蟲和大幼蟲信息素劑量的兩種假幼蟲放在巢房的邊上，假小幼蟲巢房無一封蓋，相比之下，32％的含有大幼蟲信息素的幼蟲巢房已封蓋，還有27％的大幼蟲巢房正開始封蓋。因此，工蜂可以通過信息素區分小幼蟲和大幼蟲。與小幼蟲信息素相比，含有更多甲酯的大幼蟲信息素可確認為是幼蟲巢房被工蜂封蓋的原因。

第二個實驗是在蜂群忽然失王的情況下工蜂修造急造王臺培育新王。蜂群失王時，工蜂會挑選出少量1～3日齡的小幼蟲來改造王臺，它們被當作真正的蜂王幼蟲飼養，長大后表現出的形態和成年蜂王一樣。蜂王和框架上的巢房都是從意大利蜂群里移取的。含有100倍、10倍或1倍于蜜蜂幼蟲信息素濃度的石蠟假幼蟲被安放在巢房的底部，之后被安置在無王群的巢脾中間。48小時后，工蜂在含有100倍和10倍幼蟲信息素濃度的假幼蟲巢房外面擴建王臺。盡管如此，工蜂更多的在10倍于幼蟲信息素濃度的假幼蟲巢房邊擴建王臺(x2＝9.4，P＜0.025)。當假幼蟲含的信息素濃度都是10倍的時候，工蜂在選擇對處于巢房底部和巢房邊緣這兩種不同位置的假幼蟲巢房進行封蓋時，更多的處于巢房更低位置的假幼蟲巢房被擴建成王臺，還有更多的位于巢房邊緣的的假幼蟲巢房開始被封蓋(x2＝46.6，P＜0.001)。因此。位置因素也是工蜂對幼蟲識別的一個重要因素，但這種影響可能只是簡單的一種工蜂對不同濃度信息素的反應。

對小幼蟲和大幼蟲信息素含有的混合酯成分進行對。兩種混合信息素間的每一種含有10倍小幼蟲信息素濃度的假幼蟲被安放在巢房底部。觀察發現，更多放有小幼蟲信息素(x2＝19.8，P ＜0.005)的假幼蟲巢房被擴建成王臺。另一個實驗幾乎在自然條件下進行，工蜂可在含有10倍于大幼蟲信息素濃度的放置在巢房邊緣的假幼蟲和含有10倍于小幼蟲信息素濃度的放置在巢房底部的假幼蟲之間進行選擇。工蜂的反應正如我們所期待的，工蜂對相應的含有小幼蟲信息素的假幼蟲巢房進行擴建王臺，而對相應的含有大幼蟲信息素的假幼蟲巢房封蓋或者開始封蓋(JU＝33.96，P＜0.0001)。因此，在無王群中，工蜂通過假幼蟲的位置、信息素濃度和信息素混合物的種類來進行選擇。

早期，弗雷和溫德引進的含有幼蟲提取物人工假幼蟲模型是適用的，但是不到4小時工蜂就會清除它們。我們嘗試在假幼蟲模型中加入戊烷和己烷的幼蟲提取物來進行實驗，但是工蜂并不接受它們。很可能是因為工蜂對這些殘留溶劑的敏感所致。在這個研究中，工蜂對石蠟假幼蟲里的激素特有的反應持續了幾天，而引進后被修建在王臺里的假幼蟲模型也是在蜂群里保持了幾個星期。工蜂并沒有封蓋所有的被用來測試的假幼蟲模型。這可以解釋為可能是我們用的信息素并不是完全混合在石蠟里面或者有還其他的物質等因素的影響。

在無王群中，工蜂對每個假幼蟲模型建造的王臺都不是一樣的，就像自然條件下發生的是一樣的，在成千上萬的小幼蟲中，工蜂只選擇其中少數幼蟲進行王臺修建。我們也對工蜂對假幼蟲模型和對真實幼蟲的反應進行比較。當假幼蟲模型也是在同樣的巢脾上時，工蜂一般選擇真實幼蟲，但是當二者不在同一巢脾上時，工蜂也會擴大假幼蟲模型的巢房來建造王臺，而且當真假幼蟲所處的不同巢脾處于相對的位置時，工蜂會在假幼蟲模型周圍修建王臺。工蜂辨認行為反應在意大利蜜蜂群里比在歐洲黑蜂群里的反應要更明顯有效，假設這些復合物可以用于種族或者家族的血緣鑒定。所以工蜂選擇其姐妹來做為蜂王而不是選擇一些具有大體蜜蜂特征的假模型來做蜂王是不足為怪的。有趣的是，當蜂王在的時候，很多放在巢脾上的像大幼蟲的模型被大量封蓋。目前仍不能確定親緣鑒定是封蓋巢房的一個特征。

另外，工蜂在王臺的建造行為中有某種可塑性。工蜂選擇含有和小幼蟲相似的假幼蟲模型，但也建造了少量含有假大幼蟲的王臺。這種狀況同樣在自然條件下被發現，當蜂群里沒有可以利用的小幼蟲時，無王群的工蜂將在大幼蟲周圍建立王臺。

為了鑒別此過程中起作用的酪類，含有這十種酯類中的每一種能的假幼蟲模型被放在同一個無王群中實驗，濃度為10-3或者10-4(w／w)，濃度為10-4相當于1/20的信息素復合物的濃度。除了甲基硬脂酸酯、甲基油酸酯和甲基亞麻酸酪外，根據混合酯的不同工蜂建造王臺的比率也不同。經過化學分析，甲基硬脂酸酯和甲基亞麻酸酯并沒有在小幼蟲表皮被發現。此外，甲基油酸酯占信息素總量的11％。一方面，誘發工蜂建造王臺的酯類在小幼蟲信息素混合物中有89％，而在大幼蟲信息素中只有36％。另一方面，誘發工蜂封蓋的酯類大幼蟲信息素里面有67％，而小幼蟲信息素里面只有23％。這個結果可以驗證一個假說：工蜂是通過信息素來區分大幼蟲和小幼蟲的。即將封蓋的大幼蟲釋放出的大量混合酯類引發工蜂封蓋巢房。而小幼蟲釋放的少量主要成分為酯類的信息素，在無王群中，引發工蜂擴大巢房建造王臺。

總結來說，無論蜂王存在與否，工蜂對假幼蟲的反應和對真幼蟲的反應是一樣的。我們推斷出三個研究的指標，也就是：組成混合酯的不同酯、信息素的濃度以及假幼蟲在巢房中的位置，這些指標對工蜂識別幼蟲有重要影響。在控制條件下，這些信息素同樣可以改變工蜂的咽下腺和卵巢的活動。更多的是甲基亞麻酸酪和甲基棕櫚酸酪，乙基棕擱酸酯是吸引瓦螨的主要成分。我們得出這樣的結論：這些脂肪酸酯混合物是一種在蜜蜂這個社會性群體化學生態學中被看作重要成分的幼蟲信息素。

引自《中國蜂業》2009，59（4） 曾云峰 譯