摘要：對蜂王漿中10-HDA的來源、結構、性質及功能等方面的研究進展進行了介紹，并對近年來不斷改進和完善的幾種測定方法，如分光光度法、色譜法、酶聯免疫法、氣相色譜-質語法等進行了簡要分析。

關鍵詞：蜂王漿；10-HDA；功能測定方法

1 10-HDA的來源、結構、性質及功能

1.1 來源

10-羥基-2-癸烯酸是由德國科學家D.J.朗格(1921)首次在工蜂上額腺中發現的，日本學者佐藤道夫也以大量數據證實，10-HDA主要分泌于工蜂的上顎腺。剛出房的工蜂上顎腺中10-HDA含量極微，隨著日齡的增加，含量有增加的趨勢，15～20日齡哺育蜂的上顎腺中含量最高，20日齡以后開始有降低的趨勢，10-HDA含量的增加與青年哺育蜂分泌蜂王漿有關，在蜂群大繁殖期含量極高，而外勤蜂上顎腺中的10-HDA含量則極低。1957年Batendt 首先報導從王漿中分離出10-HDA，至今還未在自然界其他物質中發現此化合物，所以10-HDA通常又被稱為王漿酸。

1.2 性質

10-HDA是王漿中很重要的一種脂肪酸，占總脂肪酸的50％，在王漿中的含量也相對恒定，約為1.8％左右。常溫時為白色晶體，性質穩定，在室溫或高溫下長時間存放時，結構不會被破壞或完全消失。易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚，微溶于丙酮，難溶于水，熔點為64℃。可以比較容易地從蜂王漿中將其分離出來，也可進行人工合成。

1.3 功能

大多數研究表，10-HDA具有重要的生理功能，而且在自然界中為蜂王漿所特有，所以一直以來被作為衡量蜂王漿質量及辨別其真偽的重要指標。但是，1981年日本琦玉養蜂株式會社的技術人員通過試驗發現，在蜂王漿已全部炭化的高溫條件下，王漿酸的殘余率竟高達90％以上，這個事實證明了王漿酸很穩定，也讓人們對10-HDA能否作為蜂王漿的質量指標開始產生質疑。相關試驗證明，無論貯藏條件如何，即使蜂王漿已經變質，其中的10-HDA含量都不會改變，顯然，它不適合作為蜂王漿品質的敏感指標，另外，雖然10-HDA為蜂王漿所特有，但是也可以通過很多方法進行人工合成，所以把10-HDA作為衡量蜂王漿品質優劣及是否摻假的特征指標是不恰當的。

但目前世界上很多國家仍將10-HDA作為蜂王漿的主要質量指標，尤其在出口方面，往往以其含量高低作為蜂王漿優劣和定價的關鍵。建立和改進蜂王漿中10-HDA含量的測定方法一直是研究內容之一。

2 10-HDA的測定方法

迄今為止已經建立了很多種測定10-HDA的方法，包括薄層掃描法、氣相色譜法、高效液相色譜法、分光光度法、酸度轉換法、毛細管等速電泳法、紅外光譜法和氣相色譜-質譜聯用法。上述測定方法在實際應用中各有優缺點，劉放等人曾先后對其中的一些方法進行了分析和比較。隨著色譜技術和其他相關技術的發展，原來的測定方法不斷被改進和優化，如分光光度法、色譜法等，同時許多新方法相繼被提出，如酶聯免疫吸附法、GC-MS法等。

2.1 分光光度法

包括紫外分光光度法、薄層層析-紫外分光光度法、聚酰胺薄膜層析-分光光度法、二階導數分光光度法、紅外分光光度法。對該方法研究最多的是樣品前處理的改進及最佳波長的選定。趙靜報道的三波長-紫外光譜法通過消除干擾因素，使傳統紫外光譜法導致測定結果偏高的問題得到了改善問。近年來出現的許多新的分光光度法，如示差分光光度法和一階導數分光光度法，樣品無需事先分離就能消除共有組分的干擾，測定快速簡便，是應用較廣的分析方法之一。

2.2 色譜法

包括薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、膠束電動毛細管色譜法。幾種色譜測定法中，氣相色譜法須進行硅烷化或甲酯化處理，操作較為繁瑣。薄層色譜法易受試驗環境等多種因素的影響，方法重現性差，故以高效液相色譜法較為理想。由于它具有操作較簡便、省時，結果靈敏、準確等優點，所以仍然是目前王漿酸定量分析中研究最多且有著廣泛應用前景的測定方法。色譜法的研究重點是供試樣品的準備、色譜條件的優化、流動相及固定相的選擇。值得一提的是劉滿倉等人用自行合成的乙烯基交聯氨基鍵合固定相建立了不經分離、只需稀釋就可進樣定量分析蜂王漿中10-HDA的高效液相色譜方法，使10-HDA的測定變得更加準確而簡便。孫保國等建立的膠束電動毛細管色譜法用內標法定量測定10-HDA，不但快速簡便，而且消除了其它脂肪酸的干擾，檢測成本也比HPLC法低很多。

2.3 酶聯免疫吸附法(EUSA)

免疫學檢測技術是70年代發展起來的新技術，潘榮生等人將其引用到10-HDA的檢測中，主要原理是將10-HDA結構中一端原有的羧基通過化學修飾的方式加以保護，將另一端的經基與琥珀酸酐反應，連接一個帶有羥基的“橋”，用混合酸酐法將10-HDA與載體蛋白偶聯，制備得到10-HDA，人工合成免疫原。抑制試驗顯示其檢測范圍在7.812～250 ug/g之間。對照試驗表明，用該法檢測的結果與液相色譜法的符合率為91％以上。ELISA的應用，為檢測機構和基層單位提供了一個簡便、快速、準確的10-HDA測定方法。

2.4 氣相色譜-質譜聯用法(GC-MS)

該方法選用DB-17石英毛細管柱，采用色譜柱程序升溫，利用毛細管不分流進樣及其溶劑效應技術，并應用氣相色譜-質譜選擇離子測定方式來進行測定。在試驗過程中，首先用10-HDA標準溶液通過全掃描方式做出總離子流圖，然后根據其質譜圖中的碎片離子針對各種樣品進行選擇離子測定方式的選擇試驗，最后確定73，86，124 amu碎片離子作為定量的特征目標監測離子。應用氣相色譜-質譜選擇離子測定方式具有靈敏度高、選擇性好和抗干擾的特點。

引自《中國蜂業》2006（3）