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蜜蜂蜂毒的組成

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 蜜蜂毒的組成
蜂毒的組成十分復雜,大約有40多種生理活性成分(詳細將在蜂療制品加工中敘述)在此只針對干全蜂毒主要幾種活性組成進行介紹。
 在蜜蜂毒中還含有的其他十多種活性肽:蜂毒明肽(apamine)、肥大細胞脫顆粒肽(mast cell degranulating-peptide,MCD,肽)等。
1、多肽類:蜂毒肽(melittin)、.蜂毒明肽(apamine)和肥大細胞脫粒肽(MCD peptide)等十多種肽。
⑴ 蜜蜂毒中含量最大的是抗凝血性肽蜂毒肽(melittin)占全干毒的40-60%,是蜜蜂毒中最重要的成分,其藥用價值也最高,在美國現市價高達526.8美元/mg。1952年紐曼(W.Neumamn)和哈伯曼(E.Habermamn)采用紙上電泳法從蜂毒中首次分離出來,具有直接溶血作用。蜂毒中含有兩種蜂毒溶血肽,即蜂毒溶血肽I和蜂毒溶血肽Ⅱ。蜂毒溶血肽I由26個氨基酸組成,相對分子質量為2840。氨基酸組成順序為:

GIGAVLTTGLPALISWIRKRKQQ•NH2,蜂毒溶血肽Ⅱ由27個氨基酸組成,具分子結構與蜂毒溶血肽I的區別主要是21~27位上氨基酸組成稍有不同,其21~27位上氨基酸組成為:-SKRRKQQ•NH2   
A、丙氨酸,C:半胱氨酸,G:甘氨酸,H:組氨酸,I:異亮氨酸,K:朝氨酸,L:亮氨酸,N:天冬酰胺y:脯氨酸,Q:谷氨酰胺 R:精氨酸,S:絲氨酸,T:蘇氨酸,V;短氨酸;W:色氨酸
蜂毒肽具有種的特異性,不同種蜜蜂的蜂毒溶血肽氨基酸排列稍微有些不同,但是其基本結構和生物活性是相同的。1971年,人士合成了蜂毒溶血肽I和蜂毒溶血肽Ⅱ。合成品和天然品一樣具有溶血以及其他生物活性。 
蜂毒肽(melittin)對平滑肌無直接作用,但對細胞膜具有強烈的吸附性質,具有溶血作用或肥大細胞的脫顆粒作用。從結構上看,N末端的氨基酸大多是含有較為疏水性基團的氨基酸,C末端的氨基酸多為含有親水性基團的氨基酸,具有一種表面活性劑的作用。
藥理作用:具溶血、肥大細胞脫粒,無直接對平滑肌作用及強烈的細胞膜吸附作用和激發垂體-腎上腺系統功能,使皮質激素釋放增加而起抗炎、提高免疫功能等作用。
藥效作用:抗血凝、活血、擴張血管、細胞器破損快速修復、抑菌抗炎和表皮激活等作用。
⑵ 蜂毒明肽(apamine) 占全干毒的1-3%,蜂毒明肽據認為是神經毒,對小鼠的LD50為4mg/kg(靜脈注射);在靜脈注射后先呈鎮靜作用,繼而出現興奮作用,引起呼吸困難而死亡,是蜂毒中另一種重要的多肽。其市價約為幾十美元/mg。 1964年,哈伯曼(E.Habermamn)等人從蜂毒中分離出該肽;它由18個氨基酸組成,相對分子質量為2038,分子中含有2個二硫鍵,其第13~14位上的精氨酸是神經毒性所必須的組成部分。1975年人工合成出了與天然品具有相同化學性質和生物學作用的產物。
結構式:18個氨基酸殘基,分子量為2038
CNCKAPQTALCARRCQQH•NH2 
藥理作用:對神經系統作用大,靜脈注射先呈鎮靜麻醉,后興奮引起呼吸困難甚至致死。
藥效作用:具有鎮痛和激發神經的作用。
⑶ 肥大細胞脫粒肽(Mast Cell Degranulating Peptide,簡稱MCD-肽)占全干毒的1-2.5%。肥大細的脫顆粒肽,顧名思義,對肥大細胞的脫顆粒作用很強,使機體組織釋放組織胺和5-羥基色胺,產生抗炎作用。皮內注射能提高局部膜的透過性;靜脈注射還能引起降壓作用。一般認為這是由于體內廣泛公布的肥大細胞發生脫粒而釋放出組織胺而造成的。肥大細胞脫粒肽也是蜂毒中的一種重要多肽,1966年由費雷德霍姆(B.Fredholm)發現,1973年M.Billingham將之稱為401-肽(Peptide-401)。具有與蜂毒神經肽相似的化學組成和結構。分子中也含有2個二硫鍵,且其位置與蜂毒神經肽中二硫鍵的位置很相似,同時半胱氨酸間氨基酸殘基的數目也相同,都具有堿性,C-末端殘基都被酰胺化,不含芳香族氨基酸。但是由于其分子折疊不同,因此二者的活性截然不同。1976年德國人首次人工合成出了MCD肽,1980年報道合成品與天然品一樣具有抗炎活性。
結構式:22個氨基酸 分子量為2539,
IKCNCKRHVIKPHICRKICGKN•NH2
藥理作用:對肥大細胞具有強烈脫粒作用,皮滲透性強,靜脈注射能引起降壓。
藥效作用:具降壓、擴張血管、增透皮和釋放組織胺作用,提高人體抗炎和免疫能力。
蜂毒溶血肽是蜂毒中的主要活性物質,通常占干蜂毒重的50%,  
    ⑷ 原蜂毒素
    存在于蜜蜂毒腺中,是蜂毒溶血肽的前體物質,其生物活性比蜂毒溶血肽弱,且比它多了8個氨基酸。
⑸ 心臟肽
心臟肽(Cadiopep)由11個氨基酸組成,相對分子質量約為1940,是一種毒性較低的多肽,具有抗心律失常和β-腎上腺素樣活性。
⑹含組織胺肽
含組織胺肽(histapeptid)是奧康納等人于1963年從蜂毒中分離出來的微量多肽,具有2種分子結構,且在這2種分子的C端均帶有組織胺,其意義在于這是人類第一次從自然界中獲得含有組織胺的多肽,現已能夠人工合成。
    ⑺ 其他多肽
賽卡品(secapin)、托肽品(tertiapin)、蜂毒溶血肽F(melittin—F)等最早是由英國學者從蜂毒中分離出來的強堿性多肽。賽卡品由24個氨基酸組成,蜂毒溶血肽F由19個氨基酸組成,它們都具有與蜂毒溶血肽相類似的生理作用。托肽品由20個氨基酸組成,是一種神經毒素。
2、胺類:組織胺(Histamine)約占全干毒的0.1-1%及其它活性胺類。

⑴ 組織胺
早在1935年日本學者就發現蜂毒中存在組織胺。含量為0.1%-1.5%。1974年,歐文證實蜂毒中組織胺的含量與工蜂日齡有關。1984年,日本的井上秀雄報道:剛剛羽化出房的工蜂毒囊中組織胺的量極少,14—15日齡時可達1.4μg左右,21~22日齡時又降至0.9μg左右,28~29日齡時高達2.1μg左右,35—36日齡時為1.5μg左右。蜂毒中的組織胺所起的作用主要是引起平滑肌和橫紋肌的緊張收縮,使皮膚產生灼痛感。
藥理作用:具擴張血管、增強通透、降壓和致敏作用及調動免疫功能等作用。
藥效作用:少量使用活血和脫敏及提高抗炎與免疫能力等。
⑵ 兒茶酚胺
小分子的兒茶酚胺類物質被認為是蜂毒中的抗炎成分之一。其含量的變化與日齡和季節有關。多巴胺是去甲腎上腺素的前身,在蜂毒中最先達到較高含量,14~15日齡時可達0.8μg左右;去甲腎上腺素逐漸增多,21~22日齡時可達0.4μg左右,35~36日齡時可達0.5μg左右。1982年,歐文等人證實8月中旬工蜂蜂毒中胺含量最高。另外,蜂毒中還含有5—羥色胺、精胺、精脒等,但含量極低,5—羥色胺量顯著低于黃蜂中的含量;約含有0.54μg的腐胺。
3、 酶類:蜜蜂毒中含有至少50多種酶類,現在主要介紹研究較多的2種酶,磷脂酶A2(pha-sphalipase-A2)約占全干毒的1-2%;透明質酸酶(hyalusonidaso)約占全干毒的1-3%等酶類。
    ⑴ 透明質酸酶
透明質酸酶幾乎是所有動物毒素中共有的一種酶,但它沒有直接毒性,其很強的生物活性使其參與蜂毒對組織的局部作用,促進蜂毒其他組分在體內的擴散和滲透。其分子結構尚未完全弄清楚,但已知其相對分子質量約為42000~44000,N—端為精氨酸,分子中含有18個酪氨酸和少量的丙氨酸、蘇氨酸,無游離的琉基;同時,分子中還含有半乳糖、果糖和甘露糖。剛羽化的工蜂毒腺中就含有該酶,羽化第二天活力達到最大,且這種強活力在工蜂的整個生命活動中一直保持著。
藥理作用:具分解透明質酸的作用和致敏及調動免疫功能等作用。
藥效作用:對骨關節軟組織具有縮水作用,少量使用可脫敏和提高抗炎和免疫能力等。
    ⑵ 磷脂酶A2
蜂毒中的磷脂酶A2在被人證實之前曾有一個有趣的試驗。1971年美國科學家使用蜂毒中一種被他們稱為minimine的微量多肽進行果蠅幼蟲生理活性的試驗,發現當給果蠅幼蟲注入亞致死劑量的該物時,幼蟲只能發育成只有正常果蠅1/4大小的果蠅,但是它們的后代,無論幼蟲或成蟲,均為正常大小。1 976年,P.H.Lowy等人證實,使果蠅發生此異常變化的minimine就是磷脂酶A2。磷脂酶A2具有許多藥理作用,尤其是具有很強的溶血作用。
藥理作用:具分解卵磷脂致敏作用和調動免疫功能等作用。
藥效作用:少量使用可脫敏和提高抗炎和免疫能力等。
    ⑶ 酶抑制劑
蜂毒中蛋白酶抑制劑的存在具有重要的生物學意義,這些抑制劑不易被胃蛋白酶水解,  R-耐高溫。當蜂毒注人人或動物體內后,其組分必定與被蜇對象體內的蛋白分解酶相遇,此時。酶抑制劑可以保護蜂毒中的其他酶類和多肽不被分解。
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