蜂王人工授精技術(shù)的操作要點(diǎn)
蜂王人工授精技術(shù)的操作要點(diǎn)
蜂王人工授精技術(shù)是一種借助器械給蜂王進(jìn)行人工配種的技術(shù)，運(yùn)用此項(xiàng)技術(shù)不但可以準(zhǔn)確無誤地使處女王和選定的雄蜂交配，而且還可進(jìn)行在自然狀態(tài)下根本不可能發(fā)生的交配行為，如母子回交、父女回交、單雄授精等。蜜蜂人工授精技術(shù)廣泛用于原種保純繁育，培育近交系，雜交制種以及品種的提純復(fù)壯等方面。
一、雄蜂和處女王的選擇
雄蜂的質(zhì)量關(guān)系著授精后蜂王的質(zhì)量，與發(fā)育充分，體質(zhì)健壯，無病害等優(yōu)質(zhì)雄蜂受精后，蜂王不但開產(chǎn)的時(shí)間早，而且產(chǎn)卵旺盛，維持正常產(chǎn)卵的時(shí)間也長(zhǎng)。捕捉雄蜂的時(shí)間最好在中午12時(shí)之后至15時(shí)之前，在蜂群的巢門口選參加婚飛歸巢的雄蜂。性成熟的雄蜂行動(dòng)敏捷，進(jìn)巢迅速，因此，須在巢門口設(shè)置隔雄柵等障礙，才易于捕捉，凡腹部堅(jiān)實(shí)又較小的，多數(shù)是性成熟雄蜂。腹部松軟的，較大的，多未成熟。婚飛歸巢的雄蜂興奮度較高，捕捉時(shí)若指力過大或受到壓擠，其體內(nèi)陽(yáng)莖則立即外翻并射精，所以要注意輕拿輕放。
授精前要對(duì)處女王進(jìn)行選擇，一般是以個(gè)體大，腹部碩長(zhǎng)，行動(dòng)穩(wěn)健活潑的處女王為佳。適宜處女王授精最佳時(shí)期為10～13日齡，也就是說處女王出房后10～13日。如果授精過早，由于處女王未到性成熟期，雖然已經(jīng)授精，但精子轉(zhuǎn)移到蜂王貯精囊的速度較慢，精液在蜂王輸卵管內(nèi)滯留時(shí)間較長(zhǎng)，授精蜂王遲遲不能產(chǎn)卵，有的精液在蜂王輸卵管內(nèi)變質(zhì)導(dǎo)致蜂王死亡。若授精過晚，處女王在核群及框式王籠內(nèi)時(shí)間過長(zhǎng)，影響核群及框式王籠的使用效率。
二、儀器設(shè)備及消毒滅菌方法
主要儀器設(shè)備有實(shí)驗(yàn)臺(tái)、藥品柜、蒸餾水器、體視顯微鏡(工作距離100毫米左右)、生物顯微鏡(1600×)、蜂王人工授精儀、微量注射器、高壓滅菌鍋、雄蜂籠、酒精燈、電爐、二氧化碳鋼瓶、膠管、常用玻璃器皿、注射器及日常用品。
實(shí)驗(yàn)室地面用5%來蘇兒噴灑消毒;實(shí)驗(yàn)室空間則用紫外線燈滅菌15分鐘。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面用75% 酒精擦拭。耐高溫的授精器械和附件用高壓滅菌鍋滅菌15～20分鐘，不耐高溫的器械用75%的酒精擦拭或灌洗滅菌。塑料注射針頭等用酒精消毒滅菌后，再用無菌蒸餾水加壓沖洗5～6遍。
三、采集雄蜂精液及注意事項(xiàng)
采集雄蜂精液前先強(qiáng)迫排精。當(dāng)一切準(zhǔn)備工作就緒時(shí)，在飛翔籠中捉出飛翔有力，腹部較堅(jiān)實(shí)的雄蜂，通過手向腹部尾端施加壓力，使腹腔的血淋巴擠壓內(nèi)陽(yáng)莖，迫使陽(yáng)莖漸次外翻。當(dāng)陽(yáng)莖球末端冒出淡黃褐色精液時(shí)，停止擠壓。在加壓時(shí)用力要穩(wěn)妥，切勿操之過急，如用力過大，容易導(dǎo)致精液飛濺或陽(yáng)莖球破裂。同時(shí)還要注意不要讓外翻的陽(yáng)莖球及精液接觸到雄蜂體表面及操作者的手指，以及造成污染。隨即用微量采精器采集球面上的精液。首先將采精器吸入一小段空氣，使稀釋液與精液有氣泡相隔，以免精液混入大量稀釋液。但吸入的氣泡不能太大，如果吸入空氣較大，在采集精液或以后授精過程中受到阻力時(shí);空氣會(huì)膨脹和壓縮變形，給采集精液或授精帶來不便，采集精液時(shí)，針尖要貼緊精液的表面，但又不能過深，以免將黏液吸入。采集完第一只后，再采集下一只雄蜂精液時(shí)，將前一只雄蜂精液推出針尖外一少部分，使其與準(zhǔn)備采集的精液面相接觸，這樣既可防止吸入空氣，又可減少吸入黏液的機(jī)會(huì)。一旦發(fā)現(xiàn)吸入黏液要盡快排出，哪怕是稀黏液也不可以混入精液吸入針頭內(nèi)。因?yàn)轲ひ翰粌H會(huì)堵塞針頭，如注射到蜂王側(cè)輸卵管后會(huì)凝固而堵塞輸卵管，這樣不僅影響精子進(jìn)入貯精囊，而且還會(huì)造成蜂王死亡。采集精液結(jié)束時(shí)，針頭內(nèi)仍然要吸入一段空氣，再用稀釋液封口，以免針口因精液凝固而堵塞。
四、授精及操作要求
授精要求進(jìn)針角度合適，部位準(zhǔn)確。生殖道無損傷，操作過程無污染，授精量足，操作速度快。
首先把裝有處女王的麻醉室固定在授精儀的麻醉室固定夾上，并調(diào)節(jié)工作距離，同時(shí)移動(dòng)授精儀(或顯微鏡)使處女王的腹部呈現(xiàn)在視野中央，調(diào)節(jié)至清晰為止。待處女王通過麻醉進(jìn)入昏迷狀態(tài)時(shí)，移動(dòng)授精儀的背、腹鉤操縱桿，打開交配腔。這時(shí)，將背鉤伸到蜂王螫針鞘基部，并讓它嵌入基部的三角縫內(nèi)。背鉤嵌入后，再一次調(diào)整背、腹鉤，把背腹板的距離拉開。此時(shí)即可看到交配腔中央靠近螫針鞘基部有一皺褶開口，該開口就是陰道口，移動(dòng)注射器，排去針頭前端的保護(hù)液及氣泡，繼而施動(dòng)縱向?qū)к壥贯樇饨咏幍揽冢瑢㈥幍捞结槻迦腙幍溃瑝鹤￡幍腊晖唬龟幍揽跀U(kuò)張。再調(diào)節(jié)縱向?qū)к壥贯樇庋刂结樀谋巢啃煨爝M(jìn)入陰道，直至中輸卵管，取出探針。當(dāng)進(jìn)針深度達(dá)1.8毫米時(shí)，略感到受到阻力后停止進(jìn)針，然后將針頭稍退出一點(diǎn)，開始注射精液。一次性授精通常注射8微升;二次性授精每次各注射4～5微升精液。第一次與第二次授精間隔時(shí)間為24～48小時(shí)。注精完畢，稍待10～15秒后退出針頭，卸下麻醉室，小心退出蜂王，給蜂王作上標(biāo)記，待蘇醒后送回原核群。
五、授精蜂王的管理
授精蜂王的管理，是指授精后至開始產(chǎn)卵這段時(shí)間的管理。蜂王人工授精是人工操縱器械完成的，蜂王沒有經(jīng)過婚飛，雖然進(jìn)行了授精，但是人工授精后的蜂王仍然會(huì)飛出巢外進(jìn)行自然交尾活動(dòng)。因此，必須采取相應(yīng)的管理措施，防止蜂王再次自然交尾。目前控制人工授精蜂王出巢再交尾，多數(shù)是采取在小核群的巢門口安裝隔王珊或脫粉片的方法，控制蜂王飛出巢外。