美洲幼蟲腐臭病，簡稱美幼病，英文縮寫AFB，是一種蜜蜂傳染性疾病，由類幼蟲芽孢桿菌(最初定名為幼蟲芽孢桿菌)引起，這種病菌屬革蘭氏陽性的產(chǎn)芽孢厭氧菌。感染此病的蜜蜂個體在幼蟲和蛹階段，先變黃，再變黑直至腐爛，產(chǎn)生大量粘性物質(zhì)殘留在蜂巢內(nèi)壁上，造成污染。美幼病是為數(shù)不多的能夠毀滅整群蜂的嚴(yán)重病害之一，加之病原菌孢子壽命長，預(yù)防和控制美幼病非常困難。從20世紀(jì)50年代開始，在美國防治這種病害的唯一方法是使用一種叫“土霉素”的抗生素(簡稱OTC，一種四環(huán)素類抗生素)，當(dāng)時這種藥品的商品名為“土霉素”。土霉素在溶液中很容易分解，因此有人認(rèn)為這種藥可能不會污染蜂蜜。

最近，美國的很多蜂農(nóng)發(fā)現(xiàn)用土霉素防治美幼病的效果越來越差。Miyagi等研究證明，從患有美幼病的幼蟲體內(nèi)提取的類芽抱桿菌的幼蟲出現(xiàn)了抗土霉素的變種，試驗(yàn)所用子脾是1998年從明尼蘇達(dá)州的蜂群抽取的，土霉素對抽樣蜂群的治療效果很差。

為了應(yīng)對不斷發(fā)生的類芽抱桿菌藥物抗性事件，多年來美國農(nóng)業(yè)部已經(jīng)對可選用的抗生素進(jìn)行仔細(xì)篩選。1970年，泰樂菌素首次被報道作為治療美幼病的候選藥物。Moffett等發(fā)現(xiàn)在蔗糖糖漿中摻入少量泰樂菌素飼喂感染美幼病的蜂群，32天內(nèi)患病蜂群康復(fù)，對感病蜂群進(jìn)行l(wèi)周2次的治療(共進(jìn)行12次)，到次年7月所試蜂群未復(fù)發(fā)。用乳酸泰樂菌素治療患病蜂群，可采用兩種飼喂方法：加入糖水中飼喂蜂群和加在煉糖飼喂。采用上述方法對感病蜂群每周治療1次，至少3周，大部分美幼病群得到控制。總體來說，直接飼喂要比噴灑效果更好。對于患病嚴(yán)重的蜂群康復(fù)之后，應(yīng)再堅持使用，按每群1 g乳酸泰樂菌素的劑量至少使用3周(每周1次)。按照以上劑量治療患病蜂群，25群只有2群在秋季再次出現(xiàn)輕微感染，可能是由于治療時間少于3周的緣故。Hitchcock 等又進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)，對患病蜂群施以更小劑量的酒石酸泰樂菌素，即治療一次所用的泰樂菌素量為每群0.25 g或0.1 g，縮短治療間隔時間，大約每3天1次，大約7周，結(jié)果對美幼病的療效達(dá)到100％。

泰樂菌素對成年蜂無毒副作用，對蜜蜂幼蟲的毒性也小于土霉素。通過在實(shí)驗(yàn)室中對未成年工蜂進(jìn)行藥效試驗(yàn)，證實(shí)蜜蜂幼蟲耐藥性很大，所能忍耐食物中抗生素的劑量為0.005％～0.04％。實(shí)驗(yàn)室研究表明食物中摻人的孢子達(dá)到一個非正常量(每毫升含1.5×108個孢子)，中度劑量的泰樂菌素就可以防止蜜蜂小幼蟲感染類芽孢桿菌。在治療過程中增加抗生素的劑量，雖然對幼蟲和蛹的發(fā)育影響不大，但不能達(dá)到致死濃度(＞0.05％)。煉糖中泰樂菌素更易被采集蜂取食，最高可達(dá)800 mg/7g 糖。當(dāng)分別用20 mg，100 mg，200 mg，400 mg和800 mg的濃度進(jìn)行試驗(yàn)時，未發(fā)現(xiàn)對蜂群產(chǎn)生負(fù)面影響，其中一定劑量范圍的泰樂菌素對美幼病的治療效果與標(biāo)準(zhǔn)劑量的四環(huán)素(200 mg)相當(dāng)。200 mg的四環(huán)素或100 mg的泰樂菌素均能預(yù)防美幼病，最長達(dá)3周，而200 mg的泰樂菌素則可達(dá)到4周。100 mg以上劑量的泰樂菌素完全可以治療感染美幼病的蜂群。野外實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，每群蜂飼喂200 mg泰樂菌素可以預(yù)防蜂群感染美幼病達(dá)4周之久，再次飼喂同樣劑量的泰樂菌素可預(yù)防美幼病的時間更長，并且受蜂群和季節(jié)因素的影響，泰樂菌素有效控制時間要比四環(huán)素長33％。

泰樂菌素可以有效的控制AFB病菌對土霉素的抗性問題，而不會引起成年蜂和幼蟲的死亡。Elzen等發(fā)現(xiàn)在美幼病的最初治療階段，每周飼喂1次20 g精制細(xì)砂糖中添加200 mg泰樂菌素(最佳比例)劑量，飼喂3周，45天內(nèi)蜂群的癥狀明顯減輕，治愈后蜂群6個月未發(fā)現(xiàn)再次感染。而且用多種高劑量的泰樂菌素(20 g精制細(xì)砂糖中添加600 mg或1000 mg泰樂菌素)持續(xù)飼喂蜂群3個繁殖周期，與對照組相比沒有出現(xiàn)死亡率明顯升高的現(xiàn)象。試驗(yàn)采用另一種治療方法進(jìn)行驗(yàn)證，即利用混有泰樂菌素的煉糖拌人植物油制成小餅飼喂，泰樂菌素的劑量與前種方法相同，這種方法同樣可以有效地控制美幼病的癥狀，但是蜂巢小甲蟲(Aethina tumida MuDay)的數(shù)量明顯增加。由于蜂巢小甲蟲對蜂群具有破壞性，這種方法沒有得到權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)可。所以還是在白砂糖中直接添加泰樂菌素的方法更為可取。

A1ippi 等對采自不同地區(qū)的67個類芽抱桿菌樣品進(jìn)行泰樂菌素的敏感性測定，確定了它們的最小抑菌濃度(MIC，在培養(yǎng)狀態(tài)下，抗生素能夠抑制細(xì)菌生長的最低濃度)。MIC值范圍是0.0078～0.5 μg/mL，這是所有AFB病原菌的分離菌均不能對泰樂菌素產(chǎn)生抗性的最低值。

補(bǔ)充試驗(yàn)對100 mg和200 mg劑量的泰樂菌素進(jìn)行了評價，證實(shí)泰樂菌素實(shí)際用量與糖的最適比例。將泰樂菌素加入到20g精制細(xì)砂糖中，每隔7天飼喂蜂群1次，共飼喂3次。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過45天，200 mg劑量組控制了抗性，而l00 mg劑量組未完全控制抗性。100 mg劑量組的10群蜂中有1群出現(xiàn)癥狀。所以，200 mg泰樂菌素每隔7天飼喂1次，共飼喂3次為最適劑量。

Kockansky 等對溶解于蔗糖糖漿中的泰樂菌素和土霉素的穩(wěn)定性進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)在34℃黑暗條件下，溶于高純蔗糖糖漿中的土霉素的半衰期為7天(半衰期為物質(zhì)降解50％所用的時間)；而泰樂菌素的穩(wěn)定性明顯較高，其半衰期為186天。泰樂菌素復(fù)合物(泰樂菌素和其降解產(chǎn)物混在一起)的半衰期則更長，達(dá)到287天。溶于商品化蔗糖糖漿中的抗生素相對較低，土霉素的半衰期為6.3天，泰樂菌素的半衰期為75天。這些抗生素溶于高純化和商品化的蔗糖糖漿中所表現(xiàn)出來的穩(wěn)定性差異可能是金屬離子污染的緣故，例如鐵和銅離子可以顯著催化生物材料發(fā)生氧化反應(yīng)。 　　

泰樂菌素和蜂蜜混合經(jīng)長時間放置后，測定其中泰樂菌素殘留物的穩(wěn)定性。利用液體層析法分析，從稀釋的蜂蜜中提取殘留物。發(fā)現(xiàn)泰樂菌素經(jīng)長時間放置之后轉(zhuǎn)化為脫碳酶糖泰樂菌素(desmycosin)，其半衰期在34℃時大約4個月。 　　

蜂蜜中的脫碳酶糖泰樂菌素似乎更加穩(wěn)定，并且這兩種抗生素的總量在9個月后并未明顯減少。因此，利用泰樂菌素治療美幼病時要謹(jǐn)慎，以免其殘留物持續(xù)污染蜂蜜。

AFB病原菌對土霉素的抗性不斷發(fā)生，說明大量使用抗生素會降低其使用周期，在使用泰樂菌素過程中也應(yīng)考慮以上情況。多年來，特拉霉素作為一種預(yù)防美洲幼蟲腐臭病的藥物，而不是作為治療性的藥物。

2005年10月在美國，泰樂菌素(實(shí)際上為酒石酸泰樂菌素)被推薦用于預(yù)防蜂群美洲幼蟲病，但它還不能作為一種治療性的方法。其主要的使用方法如下：將200 mg酒石酸泰樂菌素混入20 g糖粉中，立即撒在于脾上部邊框上緣，每周治療1次，連續(xù)3周。 　　

彭文君 譯自《蜜蜂集錦》2008年第11期 　　

《中國蜂業(yè)》2009，59（3）